آزمایش DPPH یکی از رایج ترین و ساده ترین روش ها برای ارزیابی توان آنتی اکسیدانی ترکیبات طبیعی، عصاره های گیاهی، مواد غذایی و دارویی است.
DPPH یک رادیکال آزاد پایدار با رنگ بنفش تیره و جذب نوری قوی در طول موج 517 نانومتر است. زمانی که یک ترکیب آنتی اکسیدانی با آن واکنش می دهد، الکترون یا هیدروژن به DPPH منتقل کرده و آن را احیا می کند؛ رنگ محلول از بنفش به زرد روشن تغییر کرده و شدت جذب کاهش می یابد.
این کاهش جذب، معیاری از قدرت آنتی اکسیدانی (Radical Scavenging Activity) نمونه موردنظر است.
مراحل کلی انجام آزمایش
تهیه محلول DPPH (معمولاً در متانول یا اتانول)
افزودن نمونه با غلظت های مختلف
انکوباسیون در تاریکی برای جلوگیری از تجزیه نوری
سنجش جذب نوری در 517 nm
تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی ترکیبات طبیعی
غربالگری عصاره های گیاهی
مقایسهٔ قدرت ضد اکسیداتیو مواد غذایی
تحقیقات دارویی و بیوشیمیایی
ارزیابی کیفیت مکمل های آنتی اکسیدانی
نکات تخصصی مهم
حساس به نور است → انجام مراحل در تاریکی
دمای واکنش بر نتیجه تأثیر می گذارد
رنگ اولیه DPPH: بنفش
استانداردهای رایج: Ascorbic acid، BHT، Trolox
بهترین حلال: متانول یا اتانول با خلوص بالا
