معرفی اشریشیا کلی
اشریشیا کلی یک باکتری گرم منفی، میله ای شکل و بی هوازی اختیاری از خانواده Enterobacteriaceae است که به طور طبیعی در روده انسان و حیوانات خون گرم زندگی می کند و یکی از مهم ترین شاخص های آلودگی مدفوعی محسوب می شود.
اهمیت کشت اشریشیا کلی در میکروبیولوژی
کشت E. coli نقش اساسی در تشخیص عفونت ها، کنترل کیفیت آب و غذا، مطالعات ژنتیکی و آموزش های آزمایشگاهی دارد و به عنوان یک ارگانیسم مدل به طور گسترده استفاده می شود.
نیازهای غذایی اشریشیا کلی
این باکتری برای رشد به منبع کربن، نیتروژن، فسفر، گوگرد، عناصر کمیاب و ویتامین ها نیاز دارد و در محیط های غذایی ساده نیز به خوبی رشد می کند.
ویژگی های رشد اشریشیا کلی در محیط کشت
E. coli رشد سریعی دارد و در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد، pH نزدیک به خنثی و شرایط هوازی یا بی هوازی اختیاری به سرعت تکثیر می شود.
محیط های کشت عمومی مناسب اشریشیا کلی
محیط هایی مانند نوترینت آگار و نوترینت براث برای رشد اولیه اشریشیا کلی مناسب هستند و امکان افزایش جمعیت باکتری را فراهم می کنند.
محیط کشت مک کانکی آگار
مک کانکی آگار یک محیط انتخابی و افتراقی است که با مهار باکتری های گرم مثبت و تخمیر لاکتوز، شناسایی اشریشیا کلی را تسهیل می کند.
واکنش اشریشیا کلی در مک کانکی آگار
اشریشیا کلی لاکتوز را تخمیر کرده و کلنی های صورتی تا قرمز با هاله رسوب صفراوی در این محیط ایجاد می کند.
محیط کشت EMB آگار
Eosin Methylene Blue Agar محیطی افتراقی و انتخابی است که برای شناسایی دقیق تر اشریشیا کلی به ویژه در نمونه های آب و فاضلاب استفاده می شود.
جلای فلزی اشریشیا کلی در EMB
کلنی های اشریشیا کلی در EMB معمولاً دارای جلای سبز فلزی مشخص هستند که یک ویژگی تشخیصی مهم محسوب می شود.
محیط کشت بلاد آگار و رشد E. coli
اشریشیا کلی می تواند بر روی بلاد آگار رشد کند، اما معمولاً همولیز مشخصی ایجاد نمی کند که به افتراق آن از برخی پاتوژن ها کمک می کند.
محیط های مایع برای کشت اشریشیا کلی
نوترینت براث و تریپتیک سوی براث از جمله محیط های مایع پرکاربرد برای افزایش توده سلولی اشریشیا کلی هستند.
نقش محیط کشت در تشخیص سویه های بیماری زا
برخی سویه های E. coli بیماری زا هستند و استفاده از محیط های کشت اختصاصی به شناسایی این سویه ها کمک می کند.
کاربرد محیط کشت اشریشیا کلی در صنایع غذایی
در صنایع غذایی، کشت E. coli به عنوان شاخص آلودگی میکروبی برای بررسی بهداشت محصولات استفاده می شود.
استفاده از محیط کشت در کنترل کیفیت آب
وجود اشریشیا کلی در آب آشامیدنی نشان دهنده آلودگی مدفوعی است و محیط های کشت ویژه برای پایش کیفیت آب به کار می روند.
شرایط انکوباسیون محیط های کشت اشریشیا کلی
انکوباسیون معمولاً در دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی گراد و به مدت ۱۸ تا ۲۴ ساعت انجام می شود تا رشد مطلوب حاصل شود.
ویژگی های ظاهری کلنی های اشریشیا کلی
کلنی های E. coli اغلب گرد، صاف، مرطوب و به رنگ خاکستری مایل به سفید هستند که بسته به محیط کشت تغییر می کنند.
نقش محیط کشت در تحقیقات ژنتیکی
اشریشیا کلی یکی از مهم ترین ارگانیسم ها در مهندسی ژنتیک است و محیط های کشت آن در تولید پروتئین های نوترکیب کاربرد دارند.
استریل سازی محیط های کشت اشریشیا کلی
محیط های کشت معمولاً با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد استریل می شوند تا از آلودگی جلوگیری شود.
ملاحظات ایمنی در کار با اشریشیا کلی
برخی سویه ها پاتوژن هستند، بنابراین رعایت اصول ایمنی زیستی هنگام کار با محیط های کشت الزامی است.
توسعه محیط های کشت اختصاصی برای E. coli
پژوهش های جدید بر طراحی محیط هایی با دقت بالاتر برای شناسایی سریع تر و اختصاصی تر اشریشیا کلی تمرکز دارند.

