تعریف و معرفی محیط کشت مانیتول سالت آگار
مانیتول سالت آگار محیطی است که با غلظت بالای نمک، رشد باکتری های غیرمطلوب را مهار کرده و استافیلوکوک ها را قادر به رشد می کند. همچنین، تخمیر مانیتول توسط باکتری های هدف باعث تغییر رنگ محیط شده و امکان تفکیک بصری گونه ها را فراهم می کند.
تاریخچه و توسعه محیط
این محیط ابتدا برای شناسایی و جداسازی استافیلوکوک های بیماری زا در نمونه های بالینی توسعه یافت و با گذر زمان، به یکی از محیط های استاندارد در آزمایشگاه های میکروبیولوژی تبدیل شد.
کاربردهای بالینی
مانیتول سالت آگار برای تشخیص استافیلوکوک اورئوس و سایر گونه های استافیلوکوک در نمونه های خون، ادرار، ترشحات تنفسی و زخم ها استفاده می شود.
کاربردهای محیطی و صنعتی
این محیط در بررسی آلودگی سطوح، مواد غذایی و تجهیزات محیطی کاربرد دارد و برای شناسایی استافیلوکوک ها در صنایع غذایی و دارویی استفاده می شود.
ترکیبات شیمیایی محیط
مانیتول سالت آگار شامل آگار پایه، ۷٫۵٪ سدیم کلرید، مانیتول و شاخص pH (فنل رد) است که ترکیب آن رشد استافیلوکوک ها را تسهیل و باکتری های غیرمطلوب را مهار می کند.
ویژگی های انتخابی محیط
غلظت بالای نمک باعث مهار رشد اکثر باکتری ها می شود و تنها میکروب هایی مانند استافیلوکوک قادر به رشد در این محیط هستند.
ویژگی های تفکیک کننده
تخمیر مانیتول توسط استافیلوکوک اورئوس باعث تغییر رنگ شاخص pH از قرمز به زرد می شود، در حالی که گونه های دیگر این تغییر رنگ را ایجاد نمی کنند.
اصول کارکرد محیط
این محیط با ایجاد شرایط انتخابی و فراهم کردن مانیتول به عنوان منبع کربن، امکان جداسازی و شناسایی بصری استافیلوکوک ها را فراهم می کند.
روش آماده سازی محیط
محیط باید با دقت وزن کردن مواد، حل کردن در آب مقطر، حرارت دادن و استریل کردن آماده شود تا خواص انتخابی و تفکیک کننده حفظ گردد.
شرایط نگهداری محیط
محیط آماده باید در دمای مناسب، دور از نور مستقیم و در ظروف دربسته نگهداری شود تا قابلیت انتخابی و تفکیک کننده محیط حفظ گردد.
روش های نمونه گذاری و کشت
نمونه ها باید به صورت استریل به سطح محیط منتقل شوند و در دمای مناسب انکوبه گردند تا رشد استافیلوکوک ها صورت گیرد.
تشخیص میکروبی روی محیط
استافیلوکوک اورئوس کلونی های طلایی رنگ ایجاد می کند و محیط اطراف آن به رنگ زرد تغییر می کند. سایر گونه های استافیلوک تنها کلونی های صورتی یا قرمز تولید می کنند.
مزایای محیط مانیتول سالت آگار
سرعت بالا در شناسایی استافیلوکوک ها، کاهش رشد میکروب های غیرمطلوب و امکان استفاده در آزمایشگاه های بالینی و محیطی از مزایای اصلی این محیط است.
محدودیت های محیط کشت
برخی باکتری های غیرهدف ممکن است تحمل نمک بالا را داشته باشند و رشد کنند، که می تواند باعث تداخل در شناسایی شود. همچنین، برخی گونه های استافیلوکوک ممکن است مانیتول را تخمیر نکنند.
جایگزین ها و محیط های مکمل
در صورت عدم دسترسی به مانیتول سالت آگار، محیط های مشابه با ترکیبات انتخابی و تفکیک کننده یا محیط های پایه حاوی نمک و قندهای دیگر می توانند استفاده شوند.
نکات ایمنی در کار با محیط
کار با محیط و نمونه ها باید با رعایت اصول ایمنی، استفاده از دستکش، روپوش، عینک و تجهیزات استریل انجام شود تا خطر آلودگی نمونه و اپراتور کاهش یابد.
کاربرد در تحقیقات علمی
این محیط در مطالعات میکروبیولوژی پایه، بررسی بار میکروبی استافیلوکوک ها و مطالعه مقاومت باکتری ها به شرایط محیطی کاربرد دارد.
نحوه تجزیه و تحلیل نتایج
نتایج رشد باکتریایی می تواند با آزمون های تکمیلی بیوشیمیایی و مولکولی تأیید شود تا شناسایی نهایی و دقیق انجام شود.
نکات مهم در انتخاب محیط
برای نمونه های بالینی و محیطی، مانیتول سالت آگار با توجه به نوع باکتری هدف انتخاب می شود تا رشد هدفمند و تفکیک دقیق حاصل شود.
کاربرد در آموزش و آزمایشگاه های دانشگاهی
مانیتول سالت آگار برای آموزش شناسایی استافیلوکوک ها، تمرین های کشت و آماده سازی نمونه ها در آزمایشگاه های دانشگاهی و آموزشی مناسب است.
استانداردها و کیفیت محیط
محیط باید با استانداردهای بین المللی و آزمایشگاهی تولید شود و کیفیت آن از طریق کنترل کیفیت آزمایشگاهی بررسی گردد تا دقت و قابلیت اطمینان در شناسایی میکروب ها تضمین شود.

